Чем криохранилище отличается от обычного сосуда Дьюара

Принцип у любого сосуда Дьюара один: вакуумная изоляция, благодаря которой жидкий азот испаряется медленно. У криохранилища другая задача — долго держать большое число образцов с учётом и контролем. Поэтому горловина у него широкая (от 216 мм и более), внутри стоят штативы или стеллажи и платформа для образцов, и обычно образцы можно держать в паровой фазе над азотом.

Для нескольких десятков доз семени хватит обычного сосуда с канистрами. А вот сотни и тысячи образцов — клеточных культур, штаммов микроорганизмов, плазмы, ДНК-библиотек, эмбрионов — требуют именно криохранилища. Чем различаются виды сосудов, объясняет статья «Виды сосудов Дьюара», а об общей конструкции рассказывает статья «Как устроен сосуд Дьюара». Все наши криохранилища представлены в разделе «Криохранилища».

Паровая или жидкая фаза: от чего зависит выбор способа хранения

Образцы либо погружают в жидкий азот, либо оставляют над ним в парах. При атмосферном давлении жидкий азот имеет температуру около −196 °C, а в парах она выше и увеличивается к горловине. Значит, выбирая фазу, вы балансируете между стабильностью температуры, безопасностью и расходом азота.

Хранение в жидкой фазе

Здесь образцы находятся в жидкости, поэтому температура одинакова во всём объёме и почти не колеблется. Именно жидкая фаза даёт в карточках самые большие сроки хранения азота: у КАДАММ КХ370 это 74 сут, у КАДАММ КХ800 — 118 сут, у КАДАММ КХ1800 — 177 сут. Есть и минусы: в негерметичные ёмкости азот может попасть, а при резком нагреве он расширяется и может разорвать пробирку. Поэтому берут криопробирки и соломины, предназначенные для жидкой фазы, а персонал работает в защитных очках и маске.

Хранение в паровой фазе

Образцы размещены выше уровня азота — на платформе или в штативах. Жидкость пробирок не касается, потому азот реже проникает внутрь и пробирки реже разрываются; если в хранилище лежат разные виды биоматериала, это позволяет не допустить перекрёстного загрязнения через жидкость. Расплата за это — перепад температур по высоте и более короткий срок хранения азота. По карточкам для КХ370 он равен 11 сут (в жидкой фазе 74 сут), для КХ800 — 18 сут (118), для КХ1800 — 30 сут (177).

Как выбрать фазу

  • Ценные образцы, которые хранят долго и достают редко, лучше держать в жидкой фазе, если ёмкости допускают погружение.
  • Если к образцам обращаются часто, материалы разные, а безопасность персонала в приоритете, выбирайте паровую фазу.
  • Когда регулярно доливать азот не получается, подойдёт жидкая фаза либо хранилище с запасом азота под платформой.

Указанный в карточке срок хранения азота статический, то есть относится к закрытой горловине и отсутствию отбора образцов. Любое открытие хранилища его уменьшает. Для паровой фазы берите существенный запас и составьте график доливки.

Как считать вместимость криохранилища

Литры азота не равны количеству образцов. Вместимость определяют диаметр горловины, диаметр и высота штативов и размер пробирок. В карточках серий приведено число криопробирок 2 мл, а при возможности — также 5 мл.

Практическая последовательность расчёта такая:

  1. Для начала решите, что именно будете хранить: криопробирки 2 мл, пробирки 5 мл, соломины или пакеты.
  2. Посчитайте имеющиеся образцы и добавьте ожидаемый прирост на ближайшие годы.
  3. Предусмотрите резерв: свободные штативы пригодятся при перекладке и для аварийного размещения образцов из другого хранилища.
  4. Проверьте, что рабочая высота под штативы подходит к длине пробирок и не мешает подъёмному механизму.
  5. Убедитесь, что хранилище встанет в помещение: учтите вес заполненного сосуда и высоту потолка.

О выборе объёма, горловины и комплектации обычных сосудов рассказывает статья «Как выбрать сосуд Дьюара».

Типоразмерный ряд криохранилищ КАДАММ

Линейка начинается с хранилищ для небольшой лабораторной группы и доходит до крупного биобанка. Числа приведены по карточкам серий.

СерияОбъём азота, лКриопробирки 2 млСрок хранения, сутОсобенности
КАДАММ КХ6565240054Запас азота под платформой 30 л
КАДАММ КХ95953600 (5 мл — 1458)95Горловина 216 мм
КАДАММ КХ1451454800 (5 мл — 1944)96Горловина 216 мм
КАДАММ КХ1751756000 (5 мл — 2430)116Горловина 216 мм
КАДАММ КХ3703701560074 жидкая, 11 пароваяГорловина 320 мм
КАДАММ КХ4604601950092 жидкая, 11 пароваяГорловина 320 мм
КАДАММ КХ5505502800080 жидкая, 17 пароваяЗапас под платформой 125 л
КАДАММ КХ80080040600118 жидкая, 18 пароваяГорловина 445 мм
КАДАММ КХ85085044200130 жидкая, 25 пароваяЗапас под платформой 165 л
КАДАММ КХ1000100055500125 жидкая, 25 пароваяГорловина 500 мм
КАДАММ КХ1800180094500177 жидкая, 30 пароваяГорловина 635 мм

Если вам нужны малые объёмы и ёмкости с канистрами, откройте раздел «Сосуды Дьюара для хранения азота и биоматериала».

Паровая фаза: образцы над уровнем азота Жидкая фаза: образцы в азоте штатив штатив штатив уровень азота температура растёт к горловине

Криохранилище в разрезе: в жидкой фазе температура одинакова по высоте, в паровой повышается к горловине.

Что контролировать: уровень азота, температуру, журнал

Надёжность хранилища обеспечивает только система контроля. Для начала достаточно трёх элементов.

Уровень азота

Уровень снимают мерной линейкой при неподвижном азоте или по датчику, если он входит в вашу конфигурацию. Нижний допустимый уровень определяется высотой платформы и штативов и приведён в инструкции к хранилищу. В паровой фазе этот параметр важнее: когда уровень падает, температура верхних штативов сразу меняется.

Температура

Температуру паровой фазы измеряют датчиком на разной высоте хранилища — надо знать, где при текущем заполнении расположен верхний штатив. Сигнализация сообщает о выходе за допустимые границы раньше, чем образцы успеют нагреться.

Журнал и учёт образцов

Журнал ведут так: уровень, дата доливки, количество долитого азота, температура, подпись ответственного. Отдельно хранят реестр образцов с номером штатива, ячейкой и датой закладки. Без реестра поиск образца требует долго держать горловину открытой, и всё хранилище нагревается. О плановой доливке азота из сосуда под давлением говорится в статье «Криогенные сосуды под давлением», о правилах безопасной заливки — в статье «Эксплуатация сосуда Дьюара». Расчёт интервала между доливками приведён в статье «Сколько хранится жидкий азот».

Криохранилище с жидким азотом не устанавливают в помещении с плохой вентиляцией — испаряясь, азот вытесняет кислород. Залам хранения требуются вентиляция и датчик кислорода, а при работе с открытым хранилищем нужны защитные очки и перчатки.

Хранение эмбрионов и клеточных линий

От хранилища семени и пробирок эмбриональное отличается тем, что материал единичен и восстановлению не подлежит. Потому конфигурацию берут с запасом азота, а лучше — отдельное хранилище или отдельный штатив: если к общему хранилищу обращаются часто, риск растёт. Для соломин с эмбрионами нужны штативы под соломины, не под пробирки. О применении в ветеринарии и животноводстве читайте в статье «Сосуд Дьюара для ветеринарии: хранение семени и эмбрионов».

Клеточные культуры до заморозки и после разморозки обрабатывают в стерильных условиях и инкубируют: для этого подойдут , и . Если часть коллекции допустимо хранить не в азоте, а в сухом виде, обратите внимание на : так снижается нагрузка на азотное хранилище.

Криохранилище: цена и её составляющие

Единого ответа на вопрос «криохранилище цена» нет, ведь стоимость складывается из нескольких параметров:

  • Объём и вместимость. Больше пробирок — выше цена, зато хранение одного образца в крупных моделях обходится дешевле.
  • Горловина и штативы. В разных комплектациях по-разному входят штативы, платформа и подъёмная система.
  • Контроль. Датчики уровня и температуры, сигнализация и автоматическая доливка заказываются как опции.
  • Азот. Расходы при эксплуатации зависят от испарения: возьмите из карточки серии литры в сутки и сопоставьте с ценой азота в вашем регионе.

Стоимость и сроки поставки мы называем, когда комплектация подобрана: добавьте нужные модели в спецификацию, и инженеры подготовят коммерческое предложение. Учреждениям, которым нужны закупочные коды и стандарты, пригодится статья «ОКПД 2, ОКОФ и ГОСТ для сосуда Дьюара: закупки».

Примерный комплект для биобанка и лабораторной коллекции

ЗадачаВид и объём сосудаКарточки КАДАММЧто ещё из смежных категорий
Небольшая коллекция клеточных линий и штаммовХранилище на сотню-другую литров, паровая или жидкая фазаКАДАММ КХ65, КАДАММ КХ95, КАДАММ КХ145
Биобанк научного институтаХранилище среднего объёмаКАДАММ КХ175, КАДАММ КХ370, КАДАММ КХ460
Крупный репозиторийХранилище большого объёмаКАДАММ КХ800, КАДАММ КХ1000, КАДАММ КХ1800Сосуды под давлением для доливки
Перевозка образцов между площадкамиТранспортный или сухой отгрузочный сосудКАДАММ СДТ20, КАДАММ СДО10Транспортные сосуды
Подготовка образцов к заморозкеЦентрифугирование и разделение—

Все сосуды и криохранилища каталога собраны в разделе «Сосуды Дьюара и криохранилища».